A administração neonatal de timerosal causa alterações persistentes nos receptores opióides mu no cérebro de ratos
- Vlog da Ro
- 15 de abr.
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Introdução
O timerosal (THIM), um conservante organomercúrico em vacinas pediátricas, é suspeito de ser um fator patogênico em distúrbios do neurodesenvolvimento e demonstrou acumular-se no cérebro de bebês após a vacinação.
O estudo visa examinar a densidade de receptores opioides μ (MORs) no cérebro de ratos lactentes expostos ao THIM, dando continuidade à pesquisa anterior que demonstrou hipoalgesia persistente mediada por opioides endógenos.
A administração de THIM causou um aumento estatisticamente significativo e dose-dependente na densidade de MORs na substância cinzenta periaquedutal (PAG) e no núcleo caudado-putâmen (CPU), mas uma diminuição no giro denteado (DG), onde houve perda de sinaptofisina e neurônios em degeneração.
Procedimentos Experimentais
Ratos Wistar recém-nascidos receberam quatro injeções intramusculares de THIM dissolvido em solução salina nos dias pós-natais 7, 9, 11 e 15, em doses que variaram de 12 μg Hg/kg (dose análoga às vacinas) a 3.000 μg Hg/kg.
Os animais foram eutanasiados e decapitados na 8ª (doses mais baixas) ou 20ª (doses mais altas) semana pós-natal, e os cérebros foram processados para análise histológica e imuno-histoquímica.
As regiões cerebrais analisadas para a densidade de MORs foram a substância cinzenta periaquedutal (PAG), o núcleo caudado-putâmen (CPU) e o hipocampo, usando anticorpos monoclonais anti-receptor opioide μ de coelho.
Resultados e Análise Estatística
Para a análise da densidade de receptores, foram obtidas microfotografias das regiões DMPAG, LPAG, CPU e giro denteado, e a densidade de MOR foi calculada como a fração da área corada usando o software ImageJ.
Em ratos de 8 semanas (doses mais baixas), a análise ANOVA revelou um aumento estatisticamente significativo e dose-dependente na densidade de MOR na PAG dorsomedial (DMPAG), com efeito significativo na dose de 240 μg Hg/kg.
A imunorreatividade à sinaptofisina foi utilizada como marcador de densidade sináptica e contada em secções do hipocampo, em campos CA3, de forma semelhante à contagem de MORs.
Resultados (Densidade de Receptores)
Doses mais baixas de THIM (12 e 240 μg Hg/kg) causaram aumentos na densidade de MOR nas áreas DMPAG e LPAG em ratos de 8 semanas (Tabela 1).
A densidade de MOR na DMPAG atingiu 238% do valor de controle na dose de 240 μg Hg/kg (Tabela 1), ilustrando um aumento de receptores na PAG e CPU.
Imagens representativas (Figura 1) confirmam que o THIM aumentou a densidade de MOR na DMPAG e CPU, mas a diminuiu no giro denteado (DG).
Resultados (Doses Altas e Neuropatologia)
As doses mais elevadas de THIM (1.440 e 3.000 μg Hg/kg) em ratos de 20 semanas aumentaram significativamente a densidade de MOR na PAG e na CPU, atingindo 1.546% do valor de controle na LPAG na dose mais alta.
Em contraste, a administração de THIM nessas doses mais altas diminuiu substancialmente a densidade de MOR no giro denteado (DG), atingindo 18% do valor de controle na dose de 3.000 μg Hg/kg.
O exame neuropatológico revelou degeneração característica de neurônios do tipo isquêmico e neurônios escuros no DG, e a imunorreatividade à sinaptofisina foi drasticamente reduzida nos campos CA3 do hipocampo, sugerindo conteúdo sináptico reduzido.
Discussão
O estudo demonstra que o tratamento neonatal com THIM produz alterações acentuadas e duradouras na densidade de MORs em diversas regiões cerebrais, sendo o aumento na PAG e CPU e a redução no DG notáveis.
O aumento de MORs na PAG e CPU pode ser uma regulação positiva compensatória devido à inibição da ligação do ligante ao MOR por compostos mercuriais, ou pode ser mediado pela atividade de citocinas inflamatórias estimuladas pelo THIM.
A resposta distinta no DG, onde a densidade de MORs diminuiu, pode ser atribuída à sua função diferente no hipocampo, onde uma proporção significativa dos MORs é pré-sináptica em interneurônios GABAérgicos, ou à perda de neurônios.
Conclusão e Implicações
O estudo conclui que a administração parenteral de THIM a ratos lactentes, em doses equivalentes às utilizadas em vacinas pediátricas ou superiores, induz alterações duradouras nos receptores opioides μ e danos neuropatológicos.
As alterações persistentes de opioides cerebrais podem estar relacionadas com a hipoalgesia dos animais e podem alterar a sensibilidade de crianças suscetíveis aos opioides endógenos, contribuindo para disfunções em distúrbios do neurodesenvolvimento.
Tendo em vista a neurotoxicidade e as alterações neuropatológicas documentadas (degeneração neuronal e perda de sinaptofisina), o estudo defende a remoção do THIM de todas as vacinas infantis.
As alterações na densidade dos receptores opioides mu (MORs) nas regiões cerebrais dos ratos expostos ao timerosal neonatal têm implicações significativas para a percepção da dor e o funcionamento neurológico geral:
1. Aumento dos MORs (Substância Cinzenta Periaquedutal e Núcleo Caudado-Putâmen)
O aumento da densidade de MORs está associado a uma redução na sensibilidade à dor (hipoalgesia):
Efeito na Dor: A administração de timerosal (THIM) causou um aumento estatisticamente significativo e dose-dependente na densidade de MORs na Substância Cinzenta Periaquedutal (PAG) e no Núcleo Caudado-Putâmen (CPU).
Implicação Fisiológica: O PAG é a região do mesencéfalo associada à modulação da dor. O aumento dos MORs nesta região provavelmente amplifica a atividade dos opioides endógenos, o que, por sua vez, leva à hipoalgesia persistente (diminuição da sensibilidade à dor), conforme observado nos ratos tratados com THIM.
Mecanismo Potencial: O aumento na densidade de MORs pode representar uma regulação positiva compensatória e duradoura do receptor, semelhante ao efeito do tratamento crônico com antagonistas opioides.
2. Diminuição dos MORs (Giro Denteado/Hipocampo)
A diminuição da densidade de MORs está ligada a danos neuronais e interrupção do desenvolvimento:
Efeito na Função Cerebral: O tratamento com THIM levou a uma redução substancial na densidade de MORs no Giro Denteado (DG) do hipocampo.
Danos Neuropatológicos: Esta diminuição foi acompanhada pela presença de neurônios em degeneração e perda do marcador de vesículas sinápticas (sinaptofisina). O exame patológico dos hipocampos revelou degeneração semelhante à isquemia.
Implicações Comportamentais e Fisiológicas: O hipocampo é vital, e os opioides modulam muitas de suas funções. As consequências fisiopatológicas dessas alterações induzidas por THIM no hipocampo são consideradas "consideráveis". Alterações na densidade dos receptores, juntamente com outras alterações neuropatológicas, podem perturbar o desenvolvimento cerebral.
Contexto de Distúrbios: Espera-se que as alterações na densidade de MORs tenham efeitos fisiopatológicos significativos, particularmente em distúrbios do neurodesenvolvimento, onde o THIM é um fator iatrogênico suspeito. A desregulação da beta-endorfina e a disfunção dos opioides têm sido levantadas como hipóteses para o comportamento autista e autolesivo.
Resumo Geral
As alterações duradouras na densidade dos receptores opioides MORs induzidas pela exposição neonatal ao THIM podem alterar a sensibilidade aos opioides exógenos e endógenos, levando a consequências neurológicas, fisiológicas e comportamentais profundas. O aumento de MORs em regiões de controle da dor (PAG) resulta em hipoalgesia, enquanto a perda de MORs em regiões de desenvolvimento e memória (DG/Hipocampo) é acompanhada por degeneração neuronal e potencial interrupção da sinalização sináptica.
A pesquisa apresentada documenta várias evidências de danos cerebrais persistentes em ratos causados pela exposição precoce ao timerosal (THIM), em doses análogas ou equivalentes às utilizadas em vacinas pediátricas.
As principais evidências de danos cerebrais incluem:
1. Alterações na Densidade dos Receptores Opioides Mu (MORs)
A administração neonatal de THIM causou alterações duradouras e distintas na densidade dos MORs em várias regiões do cérebro de ratos adultos:
Aumento nos MORs: Houve um aumento acentuado, estatisticamente significativo e dose-dependente na densidade de MORs na Substância Cinzenta Periaquedutal (PAG) e no Núcleo Caudado-Putâmen (CPU).
Diminuição nos MORs: Foi observada uma tendência oposta no Giro Denteado (DG) do hipocampo, onde o tratamento com THIM levou a uma redução substancial na densidade de MORs.
Essas alterações persistentes na densidade dos receptores opioides podem perturbar o desenvolvimento cerebral e levar a consequências neurológicas, fisiológicas e comportamentais significativas.
2. Neurodegeneração e Perda Sináptica no Hipocampo
O DG, a região onde houve a redução de MORs, também exibiu danos estruturais diretos:
Neurônios em Degeneração: A diminuição da densidade de MORs no DG foi acompanhada pela presença de neurônios em degeneração.
Aparência Patológica: O exame patológico dos hipocampos de ratos tratados com THIM revelou degeneração semelhante à isquemia e coloração escura dos neurônios no DG.
Perda de Sinaptofisina: A redução de MORs também foi acompanhada por uma impressionante redução ou perda do marcador de vesículas sinápticas, a sinaptofisina. A sinaptofisina é uma proteína que regula o tráfego de MOR e a sinalização. A interrupção da sinaptofisina sugere a interrupção da formação de sinapses, poda sináptica excessiva ou degeneração neuronal.
3. Evidência de Neurotoxicidade e Acúmulo de Mercúrio
A pesquisa se baseia em dados que demonstram a natureza tóxica do THIM e seu acúmulo no cérebro:
Acúmulo de Mercúrio (Hg): Estudos anteriores documentaram que o mercúrio proveniente de injeções de vacinas contendo THIM se acumula no cérebro de macacos bebês em concentrações muito superiores às encontradas no sangue, permanecendo lá por meses ou anos. O mercúrio se acumula rapidamente no cérebro após a administração de THIM.
Neurotoxicidade: O THIM contém aproximadamente 49% de mercúrio (Hg) em peso, e séculos de experiência documentam que todas as formas de Hg são altamente tóxicas. Níveis de Hg no cérebro de bebês após a vacinação podem atingir concentrações que são neurotóxicas e matam neurônios in vitro.
Danos em Ratos em Desenvolvimento: Doses de THIM equivalentes às utilizadas em vacinas demonstraram causar danos ao cérebro de ratos em desenvolvimento.
Efeitos Fisiológicos: A exposição ao THIM também produz um comprometimento duradouro da nocicepção (percepção da dor) e uma aparente ativação do sistema opioide em ratos.
Em suma, o estudo demonstrou que a exposição precoce ao THIM não apenas altera permanentemente a modulação neuroquímica da dor e outras funções (via MORs), mas também causa danos neuropatológicos diretos, como degeneração neuronal e perda de sinapses em regiões cerebrais críticas como o hipocampo.
Citação: Olczak M, Duszczyk M, Mierzejewski P, Bobrowicz T, Majewska MD. Neonatal administration of thimerosal causes persistent changes in mu opioid receptors in the rat brain. Neurochem Res. 2010 Nov;35(11):1840-7. doi: 10.1007/s11064-010-0250-z. Epub 2010 Aug 28. PMID: 20803069; PMCID: PMC2957583.
Acessado em: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20803069/
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